El kit de diagnóstico de fluorescencia cuantitativa de ARN del virus de inmunodeficiencia humana tipo 1 (sonda de fluorescencia por PCR) está diseñado para la detección cuantitativa del ARN del virus VIH-1 en muestras de plasma humano con EDTA y se utiliza como ayuda para el diagnóstico de infección o portador del VIH.
Los resultados de las pruebas no se utilizarán como único indicador para el diagnóstico clínico y se debe realizar un análisis integral de la condición en combinación con las manifestaciones clínicas del paciente y otras pruebas de laboratorio.
- El kit NO DEBE utilizarse para Blood screening.
- Sólo para uso diagnóstico in vitro. Sólo para uso profesional.
ANTECEDENTES
El VIH pertenece a los lentivirus de la familia Retroviridae. Las partículas de VIH son esféricas, con un diámetro de 90 nm a 130 nm. El núcleo del virus es huecoy cónico y consta de dos cadenas idénticas de ARN monocatenario, proteasa, transcriptasa inversa e integrasa. El VIH-1 está ampliamente distribuido y provoca la epidemia de SIDA en todo el mundo.
En la actualidad, la investigación sobre el VIH se basa principalmente en el VIH-1. La actual cepa epidémica mundial de VIH-1 ha aparecido en tres grupos, a saber, los grupos M, O y N, entre los cuales el grupo M se puede dividir en 10 subtipos A a J, y se ha encontrado recombinación entre subtipos.
FUNDAMENTO
Los conjuntos de cebadores y sondas del VIH-1 están diseñados para detectar el gen diana conservado del virus VIH-1. Este kit se utiliza para la detección cuantitativa del ARN del VIH mediante cambios de señal fluorescente en el instrumento de PCR cuantitativa de fluorescencia.
Se utiliza un control interno para monitorear la extracción y amplificación de muestras para evitar una detección de falsos negativos.
En este kit se utiliza el tinte ROX de fluorescencia de referencia para corregir el error de muestreo y la diferencia entre los viales de PCR, lo que facilita el análisis automático de los resultados de la PCR y hace que la cuantificación sea más precisa.
VENTAJAS
- Alta sensibilidad: El límite de detección de este kit se determinó en 25 UI/mL mediante la prueba de investigación de valor de referencia.
- Esta prueba ha sido validada únicamente para su uso con plasma EDTA.
- Alta precisión con Control interno de β-globina, seguimiento de todo el proceso, evitando falsos negativos.
- Compatibilidad: con los sistemas de PCR mas comunes (SLAN-96P, ABI 7500, Roche LC 480, QuantStudioTM 5 and Stratagene Mx3000P).
INTERPRETACIÓN
Típicamente la curva de detección es en los canales FAM para detectar RNA del VIH y HEX/VIC para detectar Control Interno
- Control negativo de VIH: No se muestra ninguno de Ct. El control interno del VIH (canal HEX/VIC) da positivo y Ct ≤ 40.
- Control positivo fuerte de VIH: el rango de concentración de detección es 1,58E+05~1,58E+06UI/mL y Ct < 33.
- Control positivo débil de VIH: el rango de concentración de detección es 1,58E+02~1,58E+03UI/mL y Ct < 38.
ESPECIFICACIONES
Contiene:
- PCR mix para RT-qPCR.
- RT enhancer.
- Mix de enzimas: Taq Polimerasa y transcriptasa reversa.
- Control Interno.
- Control positivo fuerte: Pseudovirus que contienen un fragmento de gen diana.
- Control positivo débil: Pseudovirus que contienen un fragmento de gen diana.
- Referencias Cuantitativas A-B-C-D.
- Control Negativo: Solución salina.
