Este kit se utiliza para la detección cualitativa in vitro de ORF1ab y S-gen del SARS-CoV-2 en hisopos faríngeos, hisopos nasofaríngeos y esputo. Este kit también se puede utilizar para detectar mutaciones E484A, N679K, L981F, 69-70del y H655Y en el gen S del SARS-CoV-2.
La variación de B. 1.1.529 es bastante diferente de otras variantes, con más de 30 mutaciones en la proteína espiga (proteína S) y alrededor de 50 mutaciones en todo el genoma. Es probable que sea más infeccioso, tóxico e inmune a escapar.
Este kit adopta la técnica del sistema de mutación refractaria de amplificación (ARMS) para detectar las mutaciones. Los cebadores para el gen ORF1ab y las mutaciones E484A, N679K, L981F, 69-70del y H655Y del gen S están diseñados específicamente de acuerdo con el genoma del SARS-CoV-2. Las sondas para ORF1ab, E484A, N679K, L981F, 69-70del y H655Y están marcadas con diferentes tintes fluorescentes respectivamente y las mutaciones se detectarán examinando el ∆Ct entre el gen de la mutación diana y el ORF1ab.
Este kit contiene un control interno (RNasa P) para monitorear la recolección, transporte y extracción de muestras para evitar un resultado falso negativo.
CARACTERISTICAS
- Tecnologia: PCR-multiplex en tiempo real.
- Region objetivo: Gen ORF1ab, mutaciones E484A, N679K, L981F, 69-70del, H655Y del gen S.
- Control interno (CI): RNase P.
- Tiempo de Ensayo: 72 minutos.
- Especificidad clínica: 7 %.
- Limite inferior detectable: 500 copias/mL.
- Volumen de reacción: 50 uL (30 uL PCR mix-20 uL muestra).
- Tempertura de almacenamiento: -20±5ºC.
- Temperatura de transporte: -25~8ºC.
- Presentación: 50 test/kit.
COMPONENTES POR KIT
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COMPONENTES |
VOLUMEN | CONTENIDO |
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Buffer para RT-PCR |
750 uL/vial x2 | Tris hidroximetil Aminometano, cloruro de potasio, cloruro de magnesio, mezcla de nucleotidos |
| Mezcla de enzimas para RT-PCR | 1000 uL/vial x2 |
Transcriptasa inversa, Rnasina, ADN polimerasa Taq |
| Mezcla de reacción A | 250μL/vial ×1 |
Primers y sondas E484A, N679K y ORF1ab |
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Mezcla de reacción B |
250μL/vial ×1 | Primers y sondas de L981F, 69-70del, H655Y y RNase P |
| Control positivo | 500 uL |
Particulas similares a virus de genes ORF1ab, S y fragmentos de control interno. |
| Control Negativo | 500 uL |
Partículas similares a virus |
