El SARS-CoV-2 virus que conllevó a una pandemia, debido a su eficaz transmisión no sólo por parte de personas sintomáticas, sino incluso por asintomáticos y pre-sintomáticos.

Los países que han tenido éxito en el control de la pandemia lo han conseguido mediante el uso de medidas de Bioseguridad que contribuyen a la reducción de la transmisión, unidas a una política activa de rastreo y aislamiento de los sujetos infectados y la cuarentena de sus contactos al realizarse una de las diferentes pruebas presentes que detectan a este virus. Sin embargo, la influenza (gripe) y el Sars-CoV-19 son enfermedades que afectan al sistema respiratorio, pero son provocadas por diferentes virus.

El COVID-19 es causado por la infección de un nuevo coronavirus conocido como SARS-CoV-2 y la influenza es causada por la infección de los virus de la influenza. Los síntomas de la influenza y el COVID-19 son muy similares, lo que dificulta distinguir entre ambas enfermedades basándose solo en los síntomas, y por el impacto de la temporada invernal podría existir confusiones o expectativas falsas en los pacientes. De tal manera, es necesario realizar una prueba de detección para ayudar a confirmar el diagnóstico.

Actualmente, las pruebas RT-PCR y las de Antígenos, Flu A y B (Ag) mantienen una alta demanda y ayudan a determinar el tipo de enfermedad.

Nuestros test de Antígenos, Flu A y B, también conocido como prueba de diagnóstico, se realiza mediante muestra de hisopado nasal, nasofaríngeo u orofaríngeos, se basa en métodos de inmunodetección, que detecta la envoltura de las proteínas presentes en el virus y determina el tipo de infección que presente el paciente ya sea Sars-CoV-19, influenza A y B. (Procedimiento similar a la prueba PCR)

El test de antígeno es un método innovador de prueba de diagnóstico diseñado para la detección rápida del virus por influenza o COVID-19, es más rápida, fácil y aplicable en los diferentes laboratorios clínicos, permitiendo manejar los casos detectados y de ser necesario realizar el aislamiento de los pacientes, reduciendo así los contagios evitando la propagación del virus o prescribir medicamentos para combatir el tipo de influenza.

Estas pruebas tiene aval de la FDA (Food and Drug Administration), los CDC (Centro para Control de Enfermedades) de Estados Unidos, la OMS (Organización Mundial de la Salud) y aprobadas por el ARCSA en el Ecuador.

La PCR y los test de antígenos tienen una sensibilidad y especificidad similar, pero esta última no reemplaza a la PCR. Sin embargo, mantienen una rapidez en facilitar los resultados para interpretación y el costo por debajo de una PCR, hacen de esta prueba una alternativa muy atractiva para evitar rebrotes.

Continúa leyendo: ¿Qué necesita mi laboratorio para implementar la prueba de COVID-19 por PCR en tiempo real?

Es muy importante considerar que para la confirmación certera de diagnóstico es útil y necesario una RT-PCR dado que es capaz de detectar pequeñas secuencias del genoma viral en tiempo real, es la más recomendada a nivel mundial por sus resultados precisos.

No obstante, las pruebas de antígenos son efectivas especialmente en la etapa inicial de la infección, si se excede a los 10 días de haber presentado síntomas, se reduce la confiabilidad de los resultados, estos test no tienen validez para pacientes con baja carga viral o asintomáticos, pero se recomiendan realizarlas dentro de un cerco epidemiológico, en atención primaria, en personas que habitan en zonas rurales, zonas que presentan alta incidencia de virus, con el propósito de obtener una respuesta inmediata y se lleven a cabo las acciones necesarias.

¿Cómo se toma la muestra para la prueba de Antígeno Covid – 19, influenza A y B?

•  Muestra de hisopo nasal
• Muestra de hisopado orofaríngeo (opcional)
• Muestra de hisopado nasofaríngeo (opcional)

¿Cuánto tiempo para obtener el resultad?

 El período de tiempo es entre 10 a 15 minutos.

 ¿Se requiere de otra prueba?

 Generalmente, los resultados positivos son muy precisos. Es posible que sea necesario confirmar los resultados con una prueba molecular (PCR).

 ¿Qué muestra la prueba?

 Diagnostica una infección activa de SARS-CoV-19.

 ¿Cómo se interpretan los resultados en una prueba de antígenos para Covid-19?

Para SARS-CoV-2 Ag:

• Resultado positivo: Aparecen tanto la línea de control de calidad C como la línea de detección Cov.
• Resultado negativo: Solo aparece la línea de control de calidad C, sin que aparezca ninguna otra línea en la línea de detección.
• Resultado inválido: La línea de control de calidad C no aparece, lo que indica que la prueba no es válida, sin importar si la línea de detección aparece o no. Recoja una nueva muestra y realice otra prueba con un nuevo dispositivo de prueba.

Para Para Flu A/Flu B Ag:

Resultados positivos:

•  Antígeno de influenza A positivo: Aparecen tanto la línea de control de calidad C como la línea de detección de influenza A, mientras que la línea de detección de influenza B no aparece.
• Antígeno de influenza B positivo: Aparecen tanto la línea de control de calidad C como la línea de detección de influenza B, mientras que la línea de detección de influenza A no aparece.
• Antígeno positivo de influenza A y B: Aparecen las 3 líneas, incluida la línea C de control de calidad y las líneas de detección de influenza A e influenza B.

Resultado negativo:
Solo aparece la línea de control de calidad C, sin que aparezca ninguna otra línea en la línea de detección de influenza A o influenza B. Indica que el resultado de la prueba es negativo para los antígenos de la influenza A y de la influenza B.

Resultado inválido:

La línea de control de calidad C no aparece, lo que indica que la prueba no es válida, sin importar si la línea de detección de influenza A o influenza B aparece o no. Recoja una nueva muestra y realice otra prueba con un nuevo dispositivo de prueba.

Es posible implementar la prueba Covid-19 en tu laboratorio, tanto por PCR en tiempo real como por pruebas de antígenos. Nuestro equipo de profesionales te asesorará en el proceso de implementación y puesta en marcha del proyecto en función de tus necesidades. Te brindamos asesoramiento y atención según tus requerimientos.

La OMS publicó el 17 de enero una Guía provisional para la prueba en laboratorio del nuevo coronavirus (COVID-19) en pacientes humanos posiblemente contagiados recomendando cuatro protocolos de prueba: RT-PCR, protocolos de detección de ácido nucleico en desarrollo, secuenciación de genoma completo y pruebas serológicas de muestras pareadas.

Tomando en consideración estas recomendaciones,  queda claro que para poder realizar la evaluación de los casos del nuevo coronavirus (SARS-CoV-2) se requiere contar con un laboratorio equipado para este tipo de ensayos. El protocolo mediante RT-PCR es el procedimiento más utilizado actualmente, debido a que proporciona resultados altamente confiables; este tipo de ensayos son realizados en hospitales, clínicas y laboratorios  públicos o privados acreditados.

¿Qué es la PCR?

La PCR “Reacción en Cadena de la Polimerasa” es una técnica utilizada en biología molecular que permite conseguir una gran cantidad de copias de un fragmento de ADN, partiendo de una cantidad ínfima de esta biomolécula. La PCR se basa en una actividad enzimática que sucede de forma normal en las células de nuestro organismo. En las células, las ADN polimerasas son capaces de replicar el ADN nuclear, para obtener dos copias idénticas, que después serán repartidas a las células hijas en la mitosis. De este modo, en la PCR las polimerasas serán capaces de replicar, cual fotocopiadora, un fragmento de ADN, en varios ciclos, para obtener una gran cantidad de copias idénticas. Tiene múltiples aplicaciones, la más escuchada actualmente es para el diagnóstico, ya que se logra detectar un fragmento del material genético de un patógeno específico.

Prueba RT-qPCR para la detección de Covid-19

Actualmente, se realiza una variación de la técnica de PCR, debido a que el Coronavirus SRAS-CoV-2 causante de enfermedad por coronavirus COVID-19 contiene como ácido nucleico ARN (tiene una sola hélice), la cual se transcribe de forma inversa en DNA complementario (cDNA) para luego realizar la técnica de PCR cuantitativa o también denominada en tiempo real (qPCR). En la qPCR se realiza un marcaje con compuestos fluorescentes lo cual permite la recopilación de datos a medida que la PCR avanza. Durante cada ciclo, se mide la fluorescencia y la señal de fluorescencia aumenta proporcionalmente a la cantidad de DNA replicado, por este motivo, el DNA se cuantifica en «tiempo real». Esta prueba tiene una fiabilidad superior al 90%, por eso es la prueba estándar.

¿Cómo funciona la prueba por PCR en tiempo real?

1. Se toma la muestra de la persona sospechosa de presentar Covid-19; usualmente una muestra nasofaríngea por medio de un hisopado de la parte interna de la nariz o del fondo de la garganta.
2. Esta muestra se transporta a un laboratorio especializado para realizar pruebas de biología molecular.
3. Se extrae el ARN viral, se purifica y se transcribe a ADN(c) por medio de una transcripción inversa.
4. El ADN se mezcla con componentes diseñados para replicar o copiar este fragmento millones de veces en un equipo que permite ciclos de calentamiento con alta precisión. Mientras se realizan las copias se emite una fluorescencia, capturada por sensores especiales los cuales se traducen en datos para interpretar la cantidad de copias generadas.
5. Cuando la fluorescencia supera un umbral base, la prueba es positiva

¿Qué necesita mi laboratorio para implementar la prueba?

A continuación te presentamos los equipos, reactivos, materiales y consumibles para la implementación de la prueba PCR en tu laboratorio, contamos con opciones en función del presupuesto.

Equipos para pruebas COVID-19 por qPCR

Centrífugas

Los procesos de centrifugación, sonicación y agitación de muestras son procedimientos que pueden generar aerosoles de partículas finas por lo que se recomienda realizarlos dentro de una cabina de seguridad biológica tipo II.

Centrífuga Refrigerada 5810R ofrece la solución más rentable para sus aplicaciones de rendimiento medio a alto. Combina una extraordinaria versatilidad y capacidad para tubos y placas con una huella compacta extraordinaria.

Centrífuga refrigerada 5424 R es el estándar de laboratorio cuando se trata de un rendimiento de enfriamiento eficiente. Cuenta con tecnología de enfriamiento de última generación para garantizar una precisión de alta temperatura para una protección máxima de la muestra y los mejores resultados de separación. Ideal para uso diario en laboratorio.

Minicentrífuga personal Minispin de Eppendorf pequeña pero de gran potencia y extremadamente silenciosa, definida como una microcentrífuga “personal” ideal para la realización de un amplio espectro de separaciones biomoleculares y centrifugaciones rápidas (quick spins).

Cabinas de Bioseguridad

Las BSC (Cabina de Seguridad Biológica) de clase II están equipadas con luz UV la cual tiene acción germicida, estas cabinas  proporcionan 3 niveles de protección: protección del personal (el usuario), protección del producto (la muestra) y protección del medio ambiente (el laboratorio) por lo que son una opción ideal para trabajar con muestras de COVID-19.

Cabinas de seguridad Biológica Tipo II A2 se le conoce como cabina combinada. Puede conectarse mediante un ducto y se le denomina como B3. Si carece del mismo es un tipo A:Recicla el 70% del volumen dentro de la cabina. El sistema de filtración es mediante filtros HEPA y es adecuada para trabajar con agentes clasificados con nivel de bioseguridad 1,2,o 3.

Cabinas de seguridad Biológica Tipo II B2 se le conoce como cabina de extracción total. No tiene ningún tipo de recirculación. El sistema de filtración es mediante filtros HEPA y es adecuada para trabajar con agentes clasificados con nivel de bioseguridad 1,2,o 3. Todos los ductos bilógicamente contaminados presurizados negativamente. Dispone de ducto de extracción , permite trabajar con químicos tóxicos y radionucleidos.

Cabinas de seguridad Biológica Tipo II C1 esta cabina híbrida, se puede utilizar en una recirculación de tipo A con modo de trabajo microbiológico estándar, o puede ser conectado a un sistema de escape para funcionar en modo de tipo B para la manipulación de vapores químicos peligrosos o radionúclidos.

Termocicladores – Equipo de PCR en Tiempo Real

Los protocolos de la PCR en tiempo real pueden diseñarse para obtener resultados cuantitativos así como demostrar la presencia o ausencia de un fragmento de ADN o ARN o resultados cuantitativos calculando el número de copias de ADN, que al compararse con una curva estándar, establece la cantidad de microorganismos presentes en una muestra determinada o bien determinar el número de moléculas de un ARN para designar la expresión de este por ejemplo.

• Sistema PCR en tiempo Real DLAB
• Sistema PCR en tiempo Real Sansure
• Sistema PCR en tiempo Real MA6000
• Sistema PCR en Tiempo Real – Line-Gene K Plus

Reactivos – Kit de Pruebas PCR

• Kit de detección qPCR de Covid 19 sansure (incluye agente de extracción de ARN, hisopos y medios de transporte)
• Kit de detección qPCR de Covid 19 Bioperfectus Tecnologies
• Kit de Detección SARS-CoV-2 por qPCR – ANDIS

Medios de Transporte

• Medio de transporte para preservación de muestra

Instrumentos de apoyo

• Instrumentos de apoyo y Micropipetas (2-20 ul, 20-200 ul, 100-1000 ul)
• Vortex
• Bloque de Calentamiento
• Microcentrifuga

Consumibles

• Puntas con Filtro libres: DNase & RNase Free,PP, de 10 ul, 200 ul, 1000 ul
• Tubos PCR 0.2ml, 8-Tiras con Strip tapas, PP, libre de DNase & RNase
• Tubos para Microcentrífuga 1.5ml, Libre de DNase & RNase

Otros equipos/ reactivos complementarios

Kit de Extracción por Perlas Magnéticas

• Kit de extracción de Ácido Nucleico por perlas magnéticas 3DMED
• Kit de extracción de Ácido Nucleico por perlas magnéticas Bioperfectus Tecnologies

Sistema de Extracción de Ácido Nucleico

• Sistema de Extracción de Ácido Nucleico 
• Sistema de Extracción de Ácido Nucleico SSPN-2000B

Ultracongeladores

• Miniultracongeladores con diferentes capacidades
• Ultracongelador -86C con diferentes capacidades
• Ultracongelador vertical portable  -86C con capacidad de 1.8L

Termómetros Digitales

• Termómetro digital de -50C a 70C
• Termómetro digital para congeladores de -50C a 70C
• Termómetro digital de -50C a 70, Higrómetro de 20 a 99%
• Termómetro Digital para congeladores de -50C a 70C

Pruebas por Inmunoensayo de Fluorescencia Seca Cuantitativa

• Equipo Analizador de Inmunoensayo
• Kit de prueba de anticuerpos
• Kit de prueba de antígenos

Contamos con todos los equipos, reactivos, materiales, insumos y consumibles para que se pueda implementar la prueba por PCR en tiempo real en el laboratorio. Además contamos con personal calificado para asesorarlo según sus requerimientos: desde compatibilidad de equipos, instalaciones, requerimientos especiales y conocimiento en general.

Hemos realizado implementaciones de pruebas Covid-19 en Laboratorios Clínico Arriaga en Guayaquil, Laboratorio Clínico Tena y Laboratorio Clínico Molecular PUCESE.

Para más información sobre equipos puedes consultar nuestro segmento Covid-19 o nuestro catálogo digital con todos nuestros productos para realizar pruebas COVID-19

Contamos con asesores especializados que podrán asistirte en tu compra según tus requerimientos, déjanos tu correo y nos pondremos en contacto.